人肝癌組織源細胞提取物的背景及應用！
一、背景
人肝癌組織源細胞提取物是從人原代肝癌組織源細胞細胞提取的，人原代肝癌組織源細胞細胞從人肝癌組織組織制備。人肝癌組織源細胞提取物可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
人類肝細胞癌（HCC）細胞系因其親本和患者不同而具有不同的名稱。因此，根據(jù)不同來源命名的細胞系稱為人肝癌細胞系。方法取臨床肝癌患者術(shù)后肝癌組織,用酶消化法分離肝癌細胞,將其接種于無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),并在超低粘附24孔板中觀察肝癌干細胞克隆球生長情況;用MTT比色法檢測肝癌干細胞克隆球增殖能力;采用流式細胞儀鑒定并分選CD90+細胞、CD90-細胞,CD133+細胞、CD133-細胞,將4種不同細胞組成CD90+細胞CD133+細胞、CD90-細胞CD133+細胞、CD90+細胞CD133-細胞及CD90-細胞CD133-細胞,分別接種于裸鼠右側(cè)腋窩皮下觀察其成瘤能力并記錄腫瘤體積;將裸鼠腫瘤組織HE染色觀察。
二、應用
可用于HCV E2與CD81結(jié)合對Raji細胞調(diào)節(jié)及干擾素α對人肝癌細胞信號轉(zhuǎn)導途徑的影響研究：
丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是有包膜的單股正鏈RNA病毒,屬于黃病毒科。HCV基因組長約9.6 kb,有一個開放閱讀框架,編碼的多聚蛋白前體在病毒和宿主蛋白酶的作用下形成結(jié)構(gòu)蛋白(核心蛋白C以及糖基化的包膜蛋白E1、E2)和非結(jié)構(gòu)蛋白(p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)。
丙型肝炎病毒E2蛋白結(jié)合CD81分子對Raji細胞激活的調(diào)節(jié)人CD81分子是HCV的細胞表面受體,可結(jié)合HCV E2蛋白。事實上HCV假病毒顆粒(HCVpp),細胞培養(yǎng)的HCV(HCVcc)和所有血漿來源的HCV的感染性均源自與宿主表面CD81等受體分子的結(jié)合。CD81分子為四次跨膜素家族成員,有兩個胞外環(huán),分布于包括B、T淋巴細胞、NK細胞、肝細胞在內(nèi)的多種細胞表面,與細胞的活化、增殖、粘附等生物學功能密切相關(guān),尤其對于特異性免疫應答的誘導具有重要作用。
在B細胞表面,由CD19-CD21-CD81(TAPA-1)-CD225(Leu-13)共同構(gòu)成Ⅱ型補體受體復合物,該復合物與B細胞受體(BCR)共同參與B細胞活化的信號傳導。B細胞的激活需要BCR以及CD19-CD21-CD81-CD225復合物與抗原的雙重結(jié)合信號,其中,BCR與抗原分子中的抗原決定簇結(jié)合,而CD19-CD21-CD81-CD225復合物則通過CD21與補體C3裂解片段C3d結(jié)合(抗原與C3d結(jié)合)。
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